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2013-04-01
簡述成人胰腺消化、胰島分離方法：尸體胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存運輸。到實驗室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織，從胰管內插入穿刺針，絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨脹后將胰腺切片，置消化罐中并放入數顆玻璃珠，加500μm孔徑的不銹鋼絲網，旋緊罐蓋。開啟蠕動泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內，控制罐內溫度37℃，手動振搖消化罐循環消化，于10分鐘后開始取樣鏡檢，待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何選擇陽性對照？陽性對照即是100%出現該結果的“實驗”組，材料是確定的；陰性對照則是肯定不會出現結果的“實驗組”，材料也是確定的；之所以加引號，是因為除了實驗需要驗證的變量，其他條件全部都是一樣的，用來排除其他實驗情況對結果產生的影響。例如，驗證一轉基因玉米是否有抗藥性，需要選擇同種的轉基因成功的抗藥玉米做陽性對照，無轉基因的做陰性對照，從而保證除了該基因其他條件一致；一個成功的實驗，通常情況下必須有陽性對照和陰性對照排除其他干擾情況如果您需要合適的陽性對照，請核查數據表...2013-03-27
干擾素（IFN）是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細胞表面受體作用使細胞產生抗病毒蛋白，從而抑制乙肝病毒的復制；同時還可增強自然殺傷細胞（NK細胞）、巨噬細胞和T淋巴細胞的活力，從而起到免疫調節作用，并增強抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質（主要是糖蛋白），是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的細胞因子。它們在同種細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長，以及分化、調節免疫功能等多種生物活性。實驗步驟1.制備誘生劑：采用NDVF系弱毒株，以雞胚尿囊液...2013-03-25
ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟elisa試劑盒原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或...2013-03-21
軟瓊脂（softagar）實驗一般用來檢測細胞的集落形成能力。現在這種方法越來越多的用于分離癌細胞，也可以用來確認癌細胞是否具有癌化特性，為進一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎。該方法看似簡單，但如果細節掌握不好，往往導致實驗失敗或數據缺乏說服力。如果你曾經在這個實驗上栽了跟頭，請不妨在如下幾個方面進行嘗試：1.要確保在整個實驗過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態（80℃），尤其是在做基底時，如果瓊脂凝固過快會導致基底不均一；2.做瓊脂基底是應避免產生小氣泡，一旦有小氣泡產生，應...2013-03-19
血清的常見問題解答一、保存血清的方法？血清應保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。二、如何解凍血清才不會使產品質量受損？將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規則地搖晃均勻。三、如何避免沉淀物的產生?1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法（-2O℃至4℃至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如-20℃至37℃），實驗...