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氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基的使用方法以及注意事項

日期:2014-01-01瀏覽:1464次

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使用方法:
1、 稱取本品9g,加入蒸餾水或去離子水或去離子水1 L,分別加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(賴氨酸、精氨酸或鳥氨酸),攪拌加熱煮沸至*溶解后再校正pH。對照培養基不加氨基酸。分裝試管,每管2.5mL,液面復蓋約3mm高度液體石蠟。
2、 115℃高壓滅菌10min,待冷卻后備用。
3、 取待檢菌的新鮮純培養物,分別接種在含有各種氨基酸的培養基內(仔細地通過培養基內的液體石臘層接種在培養基內)和不含氨基酸的對照管內,置36±1℃培養18—24h后作初次觀察,必要時可延長至48h。
4、 氨基酸脫羧酶陽性者由于產堿,培養基呈紫色。陰性者無堿性產物,但因葡萄糖產酸而使培養基變為黃色。對照管應為黃色。

質量控制:以下菌株接種后36±1℃培養18—24h,結果公布:


注意事項:
1、經培養后對照管必須為黃色,否則氨基酸脫羧酶試驗無效。
2、有時培養時間過長指示劑被破壞,顏色可能不清楚或消失,可在試管內再加溴甲酚紫來證實。
3、接種前須將各種培養基及對照管做好標記,以免混淆,造成錯誤判斷。
4、判斷結果時,應與未接種的培養基進行比較,試驗管出現任何紫色的痕跡都可判定為陽性結果,培養時間一般不應超過4d,若時間過長,蛋白胨中其他氨基酸可被分解產堿,出現假陽性。

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