“上海滬鼎”文獻：脾多肽對非霍奇金淋巴瘤患者漿細胞樣樹突狀細胞功能及成熟的影響

凡治國，李志平，崔東海，任 超

( 安陽市腫瘤醫院普內科，河南 安陽 455000)

［摘要］ 目的 探討脾多肽對非霍奇金淋巴瘤( NHL) 患者漿細胞樣樹突狀細胞( pDC) 功能及成熟的影響。方法  收集35 例NHL 患者外周血單個核細胞，采用流式細胞儀分選 pDC，用脾多肽刺激 pDC 5 d，顯微鏡觀察pDC 形態，流式細胞術檢測 pDC 表型，掃描電鏡觀察 pDC 超微結構，不同濃度的脾多肽處理24 h 后，酶聯免疫吸附試驗檢測 pDC 上清液中干擾素 － α( IFN-α) 、腫瘤壞死因子 － α( TNF-α) 和白介素 － 6( IL-6) 水平。以 35 例同期體檢健康志愿者作為對照。結果  經不同濃度的脾多肽處理后，pDC 的表面突起逐漸明顯，隨著脾多肽濃度的增加，突起明顯變長呈成熟特征;各濃度脾多肽組 pDC 上清液中 IFN-α、TNF-α、IL-6 水平均較脾多肽 0  mg·L － 1 組有明顯上升，差異有統計學意義( P ＜ 0． 05) ，且隨著脾多肽濃度的增加而上升明顯，各濃度脾多肽組之間差異有統計學意義( P ＜ 0． 05);各濃度脾多肽組 pDC 細胞的 CD11c、CD80、CD86 表達陽性率均較脾多肽 0  mg·L － 1 組有明顯上升，差異有統計學意義( P ＜ 0． 05) ，且隨著脾多肽濃度的增加而上升明顯，各濃度脾多肽組之間差異有統計學意義( P ＜ 0． 05)。結論 脾多肽可以有效增強 NHL 患者 pDC的功能，對其分化成熟有很好的促進作用。

［關鍵詞］ 脾多肽;非霍奇金淋巴瘤;漿細胞樣樹突狀細胞

DOI: 10． 3969 / j． issn． 1673-5412． 2018． 03． 012

［中圖分類號］ Ｒ733． 1 ［文獻標識碼］ A ［文章編號］ 1673 － 5412(2018)03 － 0221 － 04

非霍奇金淋巴瘤( non-hodgkin's  lymphoma，NHL)是一種發生于淋巴造血系統的惡性腫瘤，B 細胞來源者占 85% 以上，在惡性淋巴瘤中 NHL 所占的比例遠高于霍奇金病［1］。青壯年人群是 NHL 的高發人群，近年來的流行病學資料顯示其發病率和病死率逐年上升［2］。雖然放、化療技術取得很大的發展，但由于NHL 臨床特征變化多樣，病理類型又非常繁雜，故臨床治療仍存在很多難題［3 － 4］。免疫功能缺陷是 NHL 發病的高危因素之一，免疫調節異?？赡茉?NHL 的發生、發展中起重要作用。

漿細胞樣樹突狀細胞( plasmacytoid dendritic cell，pDC) 是體內專職性抗原呈遞細胞( antigen-presenting cell，APC) ，不僅激活初始型 T 細胞產生免疫應答，而且能啟動 T 細胞介導的免疫應答，受細菌、病毒的刺激時產生一定數量的腫瘤壞死因子 － α( tumor necrosis factor-α，TNF-α) 和白介素 － 6 ( interleukin-6，IL-6) ，并逐漸向樹突狀細胞( dendritic  cell，DC) 分化，在機體免疫中起重要作用［5 － 6］。以 DC 為基礎的主動免疫治療在腫瘤治療中受到人們重視，也成了目前研究的熱點。脾多肽是由多肽、游離氨基酸、核酸和總糖組成的一種 激活及增強機體免疫功能的藥物，對機體免疫有雙向 調節作用，具有調節免疫、增強機體抵抗力、抗腫瘤及 提高骨髓造血功能等作用。目前尚沒有關于脾多肽對NHL 患者 pDC 功能及成熟的影響的報道，本研究采用流式細胞儀分選 pDC，用不同濃度的脾多肽刺激 pDC，觀察脾多肽對外周血來源的 pDC 功能及成熟的影響， 以期為 NHL 免疫治療提供依據。

1 資料與方法

1． 1    研究對象  選擇 2015 年 6 月至 2016 年 10 月我院收治的 35 例 NHL 患者作為研究對象，所有患者經病理學檢查確診為 NHL，并處于緩解期。其中男 19例，女 16 例;年齡 15 ～ 59(30． 45 ± 12． 57) 歲;Ann  Ar-bor 分期:Ⅰa 期 8 例，Ⅱa 期 12 例，Ⅱb 期 7 例，Ⅲa 期4 例，Ⅲb 期 2 例，Ⅳa 期 2 例。對照組為同期體檢健康志愿者，男 20  例，女 15  例; 年齡 18  ～ 60 ( 35． 5  ±11． 5) 歲。

1． 2    儀器與試劑  FACSCalibur 流式細胞儀( 美國BD公司);JSM6510 掃描電子顯微鏡( 日本電子株式會社);JXP15 型光學顯微鏡( 上海光學儀器廠);Bio-Ｒad Model 680 酶標儀( 美國 Bio-Ｒad 公司)。脾多肽注射液( 吉林豐生制藥有限公司，商品名: 澳蓮，批號: 15021021); 干擾素 － α( interferon-α，IFN-α) 、TNF-α、IL-6 的酶聯免疫吸附試驗試劑盒均購自上海滬鼎生物科技有限公司;胎牛血清、ＲPMI-1640  培養基、PBS 購自上海哈靈生物科技有限公司;熒光標志的單克隆抗體CD4-FITC、CD123-FE、CD11c-FITC、CD86-APC、BD- CA-2-APC、CD80-PeCy5 及同型對照 IgG1 FITC / IgG1 -PC5 購自美國 BD 公司。

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